荧光检测是一种自然发光反应，通过荧光素酶与 ATP进行反应，可检测人体细胞、细菌、霉菌、食物残渣，在15秒钟内得到反应结果。光照度通过专用设备进行测量，并以数字形式予以表示。
实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法，Real-timePCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性，低温复性，适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光，随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，求得Ct值，同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照，即可得出待测标本目的基因的拷贝数。
PCR芯片技术
实时定量PCR是检测基因表达最灵敏、最可靠的方法，但由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因，因而每次实验只能检测少数几个基因的表达水平，若要检测大量基因，则工作量巨大，耗时长久。经过对实时定量PCR体系进行优化开发出的PCR芯片，可同时进行多种基因的研究，并且还可节省在数据分析方面所花费的时间，使研究者可以在更短的时间内得到更丰富的信息，PCR芯片可广泛用于生命科学、生物技术、疾病检测、临床医学和环境检测等领域，是近年生命科学领域常用的研究手段之一。
实时定量PCR是检测基因表达最灵敏、最可靠的方法。通过在试验过程中，实时监测荧光染料的信号变化可反映出样品中的基因拷贝数，并且实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级)，因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是，由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内参基因，因而每次实验只能检测少数几个基因的表达水平，若要检测大量基因，则工作量巨大，耗时长久。通过简单的以及经过优化的实时定量PCR体系，PCR芯片随之开发出来，研究者可以同时研究大量基因，既可以进行某些特别感兴趣的信号通路的研究，也可以作为验证芯片结果的方法，PCR芯片可广泛用于生命科学、生物技术、疾病检测、临床医学和环境检测等领域，是生命科学领域的研究热点之一。
使用PCR芯片技术进行基因表达(信号通路或多个相关基因)的检测，已普遍用于生命科学研究的多个领域，如疾病发病机制研究，为研究结肠癌的程序性死亡(包括细胞凋亡和自噬)状态，Chang等应用PCR 芯片同时检测癌症组织和正常组织中与细胞凋亡和自噬相关的22 个基因的表达情况，发现肿瘤组织的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的 mRNA 表达水平是正常组织的4.01 倍，而与程序性死亡和自噬相关的多个基因，包括肿瘤坏死因子受体(TNFR)、BCL2 相关蛋白(Bax)、半胱天冬酶 9(CASP9)、半胱天冬酶3(CASP3)及损伤控制的自噬调节子(DRAM)和抗紫外线相关基因(UVRAG)表达下调，说明肿瘤组织的代谢活性增加而凋亡速率降低，这可能是肿瘤组织增殖旺盛的原因。
PCR芯片不仅成本低，而且试样、试剂、人力三者消耗量均低，速度也快，灵敏度高。作为DNA分析的重要工序PCR，更是现代生物、医药不可或缺的部分，其设备的集成化，如样品预处理系统、分离系统以及检测系统等的集成使PCR芯片在生命科学、生物技术、疾病检测、临床医学和环境检测等领域继续发挥重要作用。
