BTN70701 柱式病毒DNA提取试剂盒说明书

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BTN70701 柱式病毒DNA提取试剂盒说明书

产品编号:BTN70701

规格:50T

产品及特点

本产品是在一管式病毒DNA提取试剂盒的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等)中提取微量病毒DNA 的产品,它具有下列特点:

1. 操作简单,整个过程只需要20 分钟左右,不需要额外在洗柱液中补加乙醇。

2. 灵敏度高,通过PCR 检测到的zui终灵敏度可以达到30-50拷贝/mL。

3. 安全,不需要使用苯酚和氯fang等有机溶液。

4. 如果加上病毒离心富集步骤,zui多可以处理1.5 mL 液体病毒样品。

5. 与PCR 和荧光PCR 兼容。

6. 价廉物美,性价比远高于国外同类产品。

7. 适用于各种材料,包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。

规格及成分:

成分

规格

溶液A

30ml

离心吸附柱

50套

通用洗柱液

50ml

DNA洗脱液3.0

10ml

说明书

1份


保存条件:

常温运输及保存,有效期一年。


自备试剂:

无,但需要自备RNase-free 的1.5 mL 离心管(耗材)。


使用方法:

1. 对于液体病毒样品:在1.5 mL 离心管中加入0.1-0.2 mL 液体病毒样品。如果病毒需要富集,可以将1.5 mL 液体在4℃ 24,000 g 冷冻离心60 分钟,移弃1.3 mL 后剩下的0.2 mL 用于第2 步处理。对于拭子样品:将一个拭子放入离心管中,加入1mL 自备的生理盐水,振荡器上充分振荡半分钟,然后转移0.2 mL 到1.5 mL 塑料离心管中,用于第2 步处理。

2. 加入0.6 mL 溶液A 到一步得到的0.2 mL 样品中,振荡30 秒混匀后室温放置10 分钟。注意:溶液A 在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。

3. 短暂离心后将500 μL 溶液转移到离心吸附柱中,室温放置2 分钟。

4. 12,000 rpm 室温离心1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。

5. 将剩余溶液短暂离心后全部转移到步骤3 的离心吸附柱中,室温放置2 分钟。

6. 12,000 rpm 室温离心1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。

7. 加入0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rmp 室温离心1 分钟,弃收集管中的穿透液,把离心吸附柱放回到收集管中。

8. 12,000 rpm 室温离心1 分钟(干甩),弃含穿透液的离心管。

9. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的RNase-free 的1.5 mL 离心管中,在离心吸附柱的滤膜的中部加入30-100 μL DNA 洗脱液3.0,然后室温放置2 分钟。

10. 12,000 rpm 室温离心1 分钟,离心管中的溶液即为病毒DNA 溶液。

11. DNA 样品可以直接用于PCR,也可放-20℃长期保存。

疑难解答:

Q:提取液体样品/病毒核酸(RNA 或DNA)为何很难?

A:原因一是量少。病毒颗粒中的RNA 或DNA 是作为遗传物质保存,每个病毒zui多只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种RNA 分子,每种RNA 有很多拷贝),同时其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一),样品中病毒数往往又不是很多,使得样品中病毒核酸的绝dui量往往比一个细胞中核酸的绝dui量还少,所以操作中十分容易丢失。另外,由于得到的核酸绝dui量很少,不能使用电泳和测OD检测,只能通过PCR 或RT-PCR 检测,而PCR 或RT-PCR 的条件又需要优化,所以要确定提取是否成功十分不容易。

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日期: 2019-08-09
标签: 病毒 试剂盒 产品 特点
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