BTN70604 miRNA PAGE胶回收试剂盒说明书

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BTN70604 miRNA PAGE胶回收试剂盒说明书

产品编号:BTN70604

规格:40T

产品及特点

丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离100 nt以下的小片段RNA,尤其是20nt左右的microRNA (miRNA)分子的主要方法,但是目前市场上用于从聚丙烯酰胺凝胶中回收miRNA片段的产品还很少,为此百奥莱博开发了本产品。它具有下列特点:

1. 可以回收15-3000 nt范围内的各种长度的RNA,包括100 nt以下的miRNA片段。

2. 溶液A中含有百奥莱博RNA助沉剂RNADOWN,使miRNA回收率达到90%左右,3000nt的RNA的回收率达到30%左右。

3. 一站式,即开即用,操作简单,用户不需要自备任何试剂。

4. 扩容性好,可小规模操作,也可以大规模操作。

5. 试剂盒含百奥莱博独特的固相RNase清除剂,可清除工作环境中RNase的污染。

6. 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。

规格及成分:

成分

规格

溶液A

20ml

溶液B

40ml

溶液C

40ml

说明书

1份

保存条件:

常温运输, 4℃保存,保存期为一年。

自备试剂:

PAGE 试剂,RNA染料。

使用方法

1. 用自备的固相RNase 清除剂对实验所需要的物品进行处理(见固相RNase 清除剂使用手册)。

2. 对RNA 样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。

3. 电泳结束后用EB 或其他染料染色并确定目标RNA 条带的位置。

4. 用干净的刀片切下目的条带,置于1.5mL 塑料离心管或其他合适的塑料容器中。

5. 用吸头挤压凝胶块到芝麻大小。

6. 加入1~2 倍体积的溶液A,一般的条带加0.5 mL 即可。

7. 在摇床上室温摇晃3-5 小时(小于500nt 的片段)或12-24 小时(对1000nt以上的片段)。

8. 13000-15000g室温离心10 分钟,转移上清到新的离心管。

9. 加入2 倍体积的溶液B。注意:溶液B 有沉淀,属于正常现象,用前摇晃均匀即可。

10. 上下颠倒混匀后13000-15000 g 室温离心20-30 分钟。

11. 小心用移液枪弃上清,回收的RNA 在管底离心面形成细小白色沉淀,注意不要吸弃此沉淀。

12. 加1mL 溶液C 到洗RNA 沉淀,颠倒摇晃数次后13000-15000g室温离心5分钟。

13. 小心弃上清,短暂离心半分钟,吸尽残留的液体。

14. 将RNA 样品溶于适量的自备的RNase-free 水中或直接溶解在后续反应的反应液中,立即使用或放-70℃保存。

注意:也可以另购液相RNase 清除剂代替RNase-free 水,因为前者能抑制残留的RNase 而RNase-free 水没有此功能。液相RNase 清除剂与RNA 的后续反应(如RT-PCR)兼容。

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日期: 2019-08-10
标签: 试剂盒 产品 特点 丙烯
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