BTN61201 耐热型SYBR染料,电泳级说明书

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BTN61201 耐热型SYBR染料,电泳级说明书

产品编号:BTN61201

规格:50μL

产品及特点

本产品是改良型的SYBR Green I,它跟常规的SYBR Green I 相比检测灵敏度相当,但具有耐热、耐水解的特点,所以十分稳定,使用更加方便。

1. 稳定,本产品浓缩液可以在常温下存放一年以上,方便运输和保存。本产品的1X 工作液在常温下的半衰期为120 多天,比常规的SYBR Green I(5天)长20 倍以上。

2. 使用方便多样,既可以在制备凝胶时加入到融化的琼脂糖凝胶中,还可以象常规的SYBR Green I、SYBR Gold、SYBR safe、GelStar 一样用于电泳后染色。

3. 灵敏,其检测灵敏度跟SYBR Green I 相同,比EB 灵敏200-100 倍。

4. 低毒、环保、健康。

5. 可检测各种核酸分子,包括dsDNA、ssDNA、RNA 和Oligo。

6. 兼容性好,不但与常用的TAE、TBE 和5分钟超快电泳缓冲液SuperBuffer-2等兼容,还与常用的UV 检测系统和可见光激发检测系统兼容。

7. 对 DNA 泳动速度的影响小于常规的SYBR Green I。

8. 半衰期长,自然损耗低,可多次使用,使其相对使用成本比常规的SYBR Green I和其它非对称花青类染料低。

规格及成分:

成分

规格

Super SYBR, 10000×

50μl

说明书

1份

保存条件:

常温运输保存(避光),保存期为一年。

自备试剂:

电泳试剂。

使用方法

本产品可以在电泳中染色,优点是用量少,但如果与DNA 的比例没达到zui佳时,带型容易弥散;也可以在电泳后染色,优点是不会对DNA 电泳产生干扰,但用量大,还需要额外的染色过程。客户可以根据需要选择使用方法。百奥莱博不建议将本产品用于染色后再上样(即先将其与DNA 混合然后再上样),也不建议将其用于PAGE(因分子较大,难以进入凝胶)。

使用方法之一:电泳中染色(仅适于琼脂糖凝胶电泳)

1. 按常规方法制备琼脂糖凝胶,胶中不能含任何其他染料。

2. 将按1:10000 的比例将SuperSYBR 直接加到熔化的琼脂糖凝胶中并充分摇晃均匀(5 μL 可以加入到50 mL 熔化的琼脂糖凝胶中),然后倒胶。

3. 其余的上样、电泳、UV 观察等步骤按常规操作进行。在254 nm 紫外照射透视下,与双链DNA 接合的SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时zui好使用绿色滤光片。如果使用300 nm 紫外照射透视仪观察也可以,但效果不如254 nm。

4. 未用完的胶可以反复融化,如果保存时间在一周以上,zui好闭光。

注意:本方法的灵敏度比在熔化的琼脂糖凝胶中加EB 染色的方法高,比电泳后染色经济(后者用量大)。SuperSYBR 与DNA 结合同SYBR Green I 跟DNA 的结合一样,有时会影响DNA 样品的相对迁移率。如果出现DNA 电泳带弥散的现象,说明SuperSYBR 和DNA 的比例没达到zui佳,可以适当调节DNA 的上样量。

使用方法之二:电泳后染色

1. 按照常规方法进行电泳。

2. 用水将10000×SuperSYBR 原液稀释2500 倍成4×工作液(如:将5 μL SuperSYBR 原液加到10 mL 水和2.5 mL 5 M NaCl 中,加NaCl 的目的是促进SuperSYBR 与DNA 的结合)。由于SuperSYBR 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲和力,故建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。

3. 将电泳后染色工作液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-30 分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。

4. 在 254 nm紫外照射透视下,与双链DNA 接合的SuperSYBR 呈现绿色荧光。拍照时zui好使用绿色滤光片。如果使用300 nm 紫外照射透视仪观察也可以,但效果不如254 nm。

注意:电泳后染色工作液可以冷冻避光储存,可以在一个星期内重复使用多次。

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日期: 2019-08-14
标签: 产品 特点 检测
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