BTN51203 非酶RNA清除剂1.0说明书

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BTN51203 非酶RNA清除剂1.0说明书

产品编号:BTN51203

规格:1.5ml

产品及特点

本产品为非酶法质粒RNA和蛋白质污染的去除试剂,专用于从碱变性法纯化的质粒中去除其中的绝大部分RNA污染和大部分蛋白质污染。

1. 高效,能去除质粒粗提物中80%左右的RNA污染和60%的蛋白污染。而常用的RNase或LiCl处理只能去除RNA,不能去除蛋白质污染。

2. 快速,整个过程只需要十余分钟,不需要37℃保温。

3. 经过本产品处理过的样品,由于没有RNA和蛋白质的干扰,使用硅胶膜或其他吸附离心法吸附、回收质粒DNA的效率比没处理过的样品更高。

4. 价格不到RNase A的1/2,在质粒的大规模制备时成本优势更加明显。

5. 制备临床用(如基因治疗)的质粒DNA 时,可以减少后期在临床报批、生产、质检和使用中的很多麻烦(使用生物来源的RNase A 和蛋白酶时,容易带入对人体有害的内毒素、LPS等污染物)。

规格及成分:

成分

规格

RNA Erasol- 1

1.5ml

说明书

1份

保存条件:

常温运输和保存,有效期一年。

自备试剂:

75%乙醇。

使用方法

A)从碱变性澄清液中去除RNA和蛋白质

1. 将约1/5体积的RNA Erasol加入到碱变性澄清液中(加溶液III后离心得到的上清液一般是450 μL, 所以需要加入50 μL)。

2. 混匀后室温放置10分钟。

3. 室温8000g 离心10分钟。

4. 转移上清到一新的离心管中,后续处理跟经典的方法一样(即加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇,混匀后室温离心10 分钟,弃上清液后用1 mL 75%乙醇洗一次,短暂离心,去掉残留液体,加入适量TE缓冲液溶解质粒待用)。

B) 从质粒粗提液中去除RNA和蛋白质

1、将1/4体积的RNA Erasol-1直接加入到已经溶解在TE或其他溶解液的质粒DNA中。

2、混匀后室温放置10分钟。

3、室温8000g离心10分钟。

4、转移上清到一新的离心管中,加入等体积的异丙醇或两倍体积的乙醇。

5、混匀后室温离心10分钟。

6、弃上清液后用1 mL 75%乙醇洗一次。

7、短暂离心,去掉残留液体。

8、加入适量TE 缓冲液溶解质粒待用。

使用效果:

用经典的碱变性法从1.5mL E.coli过夜培养液中提取的pGEM-3质粒粗提物(加溶液ⅡI离心上清)经过RNA Erasol处理后(LA+RNA Erasol)与未经处理的样品(AL)电泳比较。上

样量为1/5。 

用经典的碱变性法提取的pGEM-3质粒DNA溶于TE中后,经过RNA Erasol处理的(+)与未经处理的(-)样品进行电泳比较。处理过的样品失去80%左右的RNA。

疑难解答:

Q: 电泳检测质粒DNA时也需要将其RNA污染去掉吗?

A: 是。否则RNA 将结合大部分的EB 溶液,使质粒DNA 的带型减弱。

Q: RNA Erasol-1 跟RNA Erasol-2 有何区别?

A: 1。RNA Erasol-2 处理过的样品不再需要醇/盐沉淀处理,而RNAErasol-1 处理的样品还需要醇/盐沉淀去除RNA Erasol-1;2. RNAErasol-2 与柱式硅胶膜纯化方法兼容,而RNA Erasol-1 不兼容;3是RNA Erasol-2 不但可以用于去除质粒DNA的RNA污染,还可以用于去除基因DNA的RNA污染,而RNA Erasol-1只能用于质粒DNA样品。

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日期: 2019-08-16
标签: 产品 特点 酶法 蛋白
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