Catnumber：KFS129
Storeat-20℃for6months，避光
ForResearchUseonly
一、产品描述
溶酶体蓝色荧光探针LysoBlue探针是荧光素pH指示探针，可以用来区分酸性细胞器，使得动态研究活细胞内溶酶体生物合成和功能成为可能。LysoView染料是在酸性细胞器内富集，可导致其质子化。而质子化可以减少染料的侧链上弱碱，减少荧光淬灭，使得生产的荧光强度增加。因此，LysoBlue试剂表现出pH依赖性，在酸化条件下，荧光强度增加。
这些探针可以单独或者组合使用，检测酸化的溶酶体和细胞内溶酶体的功能改变。例如，在某些肿瘤细胞的溶酶体具有较低的pH值，而有的肿瘤细胞则相反。此外，一些细胞的细胞器酸化缺陷表现为囊性纤维化和其他病症。LysoBlue探针在此类应用上非常广泛有意义。
探针光谱特性
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探针名称 |
Ex (nm) |
Em (nm) |
pKa |
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Lyso 蓝 |
373 |
425 |
5.1 |
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Lyso 绿 |
443 |
505 |
5.2 |
二、产品包装
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组份 |
KFS129 |
储存条件 |
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溶酶体蓝色荧光探针 LysoBlue |
1 mM in DMSO, 200μL |
-20℃，避光 |
三、操作说明
细胞制备与染色
取出之后，预热试剂至室温，再开盖，短暂离心小瓶，使得微量DMSO液体沉淀瓶底。
染色探针的浓度选择取决于不同的实验类型。建议使用一些初始条件进行指导摸索。
1.1 用培养基或者其他缓冲液稀释1mM的探针原液，建议使用浓度至少1μM，但为了减少可能的过量，染料浓度应尽可能保证低。
注意：有实验表明如细胞在染色后用无染料的培养基孵育，会看到荧光信号减弱以及细胞出泡现象。
1.2 对于贴壁细胞，盖玻片爬片至合适的会合度时，添加37度预热的探针染液，选择合适细胞生长的条件，
进行30分钟~2小时的孵育。再用新鲜培养基替换染色液。再选择合适滤光片的荧光显微镜观察细胞，如果细胞没有呈现染色，建议增加标记物的浓度或者增加孵育的时间。
1.3 对于悬浮细胞，离心细胞，吸出上清，轻轻用37度预热的含探针的染色液重悬细胞，选择合适细胞生长的条件，进行30分钟~2小时的孵育。再以新鲜培养基离心重悬细胞。再选择合适滤光片的荧光显微镜观察细胞，如果细胞没有呈现染色，建议增加标记物的浓度或者增加孵育的时间。
