《疫病净化技术规范 荧光RT-PCR检测法》由山东市监局颁布

   日期:2019-08-10     来源:中国仪器网    浏览:55    
核心提示:本标准规定了种猪场猪瘟净化的检测方法与判定标准、净化群的建立、净化群的维持和综合生物安全措施。
  本标准规定了种猪场猪瘟净化的测方法与判定标准、净化群的建立、净化群的维持和综物安全措施。

      耗材:1、离心管;2、PCR薄壁管;3、酶标板,移液器吸头。

  检测仪器:

  1、荧光PCR检测仪;              2、PCR仪和凝胶成像系统;

  3、高速台式冷冻离心机;       4、组织研磨器或者研钵。

  5、微量移液器;    6、酶标仪;     ;7、恒温箱;    8、高压灭菌锅。

  试剂

  1、无水乙醇,-20 ℃预冷。

  2、75 %乙醇,无水乙醇和双蒸水配制,-20 ℃预冷。

  3、dNTPs:含dATP、dGTP、dCTP、dTTP各10 mmol/L,-20 ℃保存,避免反复冻融。

  4、普通PCR引物参照GB/T 16551。

  5、荧光PCR引物和探针参照GB/T 27540。

  6、酶标检测试剂 等效采用GB/T 34729商品化试剂盒。

  采样准备:

  扁桃体采样器、灭菌0.5 mL离心管、灭菌棉签或牙签、3 % NaOH溶液、手电筒、记号笔、采样记录表等。

  采样器械应用3 % NaOH 溶液消毒处理,并用水清洗干净后再采下一份,防止交叉感染。

  抗体检测:

  依据GB/T 34729执行。按照等效商品化试剂盒说明书操作并判定结果。优先使用猪瘟病毒抗体阻断ELISA试剂盒检测猪瘟抗体。

  日常监测:

  每年对净化猪群进行2次抽检。每次采集扁桃体和血清样品,抽样比例参考表A.1。置信度95 %,预期流行率3 %。检测方法按及执行。

 
日期: 2019-08-10
标签: 规定 检测 检测方法
 
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