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毛细管电泳仪的分离过程是在缓冲液中进行,缓冲液的选择直接影响颗粒的迁移和分离。
缓冲液的选择要求是在所选的pH范围内有较强缓冲能力,在检测波长处紫外吸收低,电泳淌度小。
可先用磷酸盐缓冲体系为选择基础,初步确定pH范围后,再进一步选出更好的pH和缓冲试剂。
毛细管电泳仪分析对进样技术要求很高,进样操作事项如下:
一、进样区带越小越好:
无论采用何种进样方式,毛细管插入样品溶液的深度一般要少于毛细管总长度的1%~2%,以尽量减少样品溶液经毛细吸附进入毛细管而影响进样量的性。样品管中溶液少为5μL,进样体积为1~50n
毛细管电泳仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力;
利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展;
使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸
毛细管电泳泛指以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。
毛细管电泳仪的基本结构包括一个高压电源,一根毛细管,一个检测器及两个供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液贮瓶。
标签: 毛细管 毛细管电泳 毛细管电泳仪 电泳仪 优势介绍 2018-11-08 11:14
高效毛细管电泳是近年来发展起来的一种分离、分析技术,它是凝胶电泳技术的发展,是高效液相色谱分析的补充。该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于分析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等,HPLC分析高效、快速、微量。
毛细管电泳仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离。毛细管电泳仪与平板凝胶电泳仪的比较如下:
一、检测器选择:
1、毛细管电泳仪:多
2、平板凝胶电泳仪:少
二、分离度:
1、毛细管电泳仪
高效毛细管电泳色谱仪有机基质整体毛细管柱是采用柱内直接键合的方法在毛细管中进行原位自由基聚合反应,形成连续床固定相,不用柱塞,简化了柱制备过程。通过改变单体可引入多种官能团,有更好的多孔性和渗透性,对流动相阻力小,溶质在固定相和流动相之间快速分配,有利于实现高速分离。
有机基质整体毛细
高效毛细管电泳色谱仪是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离。由于毛细管内径小,表面积和体积的比值大,易于散热,因此,高效毛细管电泳色谱仪可减少焦耳热的产生,这是高效毛细管电泳色谱仪和传统电泳色谱仪的根本区别。与传统电泳色谱仪相比,高效毛细管
高效毛细管电色谱仪(CEC)填充毛细管柱是将固定相填充到毛细管中,通过两端烧结柱塞将固定相保持在毛细管中而成,其优点是可利用众多的HPLC固定相,根据化合物与固定相的作用不同实现高效分离,在CEC中应用广泛。
填充毛细管柱制备方法有高压匀浆填充法、电动填充法和超临界CO2法等。
一、高压匀浆
高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离。由于CE溶质区带的超小体积特性导致光程太短,圆柱形毛细管作为光学表面不够理想,对检测器灵敏度要求相当高。CE常用检测器有紫外检测器、激光诱导荧光检测器、质谱检测器和电化学检测器等
高效毛细管电泳色谱仪(CE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用带电粒子之间的电泳淌度差异和分配系数差异进行分离。电泳基本概念包括电泳现象、电泳技术、电泳速度和电泳淌度等。
一、电泳现象:
电泳现象是指带电粒子在电场的作用下,向着与其电性相反的电极方向移动的
高效毛细管电泳色谱仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度和分配系数的差异进行分离,具有三高二少的特点。
一、高灵敏度:
紫外检测器的检测下限可达10ˉ1~10ˉ15mol,激光诱导荧光检测器可达10ˉ19~10ˉ21mol。
二、高分辨率:
每米理论塔板数为
高效毛细管电泳色谱仪简称毛细管电泳仪(CE),是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继高效液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有
高效毛细管电泳色谱仪对进样技术要求很高,进样时应注意以下事项:
一、毛细管插入样品溶液后,应立即开始进样操作,完成后迅速移至缓冲液中开始电泳。否则会产生毛细作用和虹吸现象,引起误差并使谱带展宽。
二、电极不要和毛细管接触,样品贮器和缓冲液贮器液面的高度应保持平衡。
三、进样
高效毛细管电泳色谱仪(CE)在环境中的应用:
一、CE是元素形态分析的一种新型分离技术。目前用于形态分析的主要分离模式是CZE,检测器主要是UVD。
间接紫外检测是在缓冲液中加入具有紫外吸收的物质,当那些没有或有很小紫外吸收的分析物通过检测窗口时引起吸光度的减小,为自身没有发色团的无机离子、无
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