在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC 也已成为不可或缺的。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下，高效液相色谱脱气的必要性，并总结归纳了脱气常用的方法。

　　一、脱气的必要性

　　高效液相色谱仪高压输液系统由贮液器、高压输液泵、过滤器、脱气装置和梯度洗脱装置等组成。

　　一、贮液器：

　　贮液器用来提供足够数量的符合要求的流动相，以完成分析工作。所有溶剂在放入贮液罐前必须经过0.45um滤膜过滤，除去溶剂中的机械杂质，以防输液管道和进样阀产生阻塞现象。

　　高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。与经典的液相色谱相比，具有高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高的优势。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80％的有机化合物可以用HPLC来分析测定。

　　高效液相色谱仪色谱柱性能的评价包括评价内容和评价方法等方面。

　　一、评价内容：

　　1、分离效能。

　　2、对指定溶质的选择性。

　　3、在不同PH值介质中的稳定性。

　　4、不同批次但同型号填料间性能的重现性。

　　5、适宜的操作压力等。

　　高效液相色谱仪是实验中常见的仪器之一，色谱柱的灵敏度是确保实验准确性的重要原因，那么当色谱柱的灵敏度不够时，我们该如何去解决呢？应该从以下几个方面去分析：

　　1、样品量不足：解决办法为增加样品量

　　2、样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

　　一、样品预处理的重要性：

　　1、样品预处理所用时间远大于色谱分离时间。

　　2、消耗大量的溶剂和其它化学品，占分析消耗总成本。

　　操作步骤：

　　1、打开电脑

　　2、打开主机、预热

　　液相色谱仪在高效使用中需注意以下几个问题：

　　1、色谱柱中的流动相是否会会排干的问题：

　　高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。

　　1.进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。

　　高效液相色谱仪的衍生化技术衍是指将用通常检测方法不能直接检测或检测灵敏度比较低的物质与某种试剂（即衍生化试剂）反应，使之生成易于检测的化合物的过程。按衍生化方法可分为柱前衍生化和柱后衍生化。

　　一、柱前衍生化：

　　高效液相色谱仪光电二极管阵列检测器（DAD）是20世纪80年代出现的一种光学多通道检测器，是紫外检测器的重要进展，又称快速扫描紫外检测器，在高效液相色谱中得到大量使用，是高效液相色谱有发展和的检测器。

　　一、可以同时得到多个波长的色谱图，计算不同波长处的相对吸收比。

　　1.进样系统

　　一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。

　　2.输液系统

　　任何颗粒物进进高效液相色谱仪后都会在柱子进口端被筛板挡住，的结果是将柱子堵塞，表现出的特征是系统压力增加并使色谱峰变形。因此，要采取各种预防措施，包括操纵步骤和商品仪器自身的各种过滤设计，努力防止或减少颗粒物进进高效液相色谱仪中，从而延长仪器和色谱柱的使用寿命，并进步数据的可靠性。

标签： 高效 高效液 高效液相 高效液相色谱 高效液相色谱仪 液相色谱 2017-07-11 15:24