KFS130 溶酶体绿色荧光探针说明书

日期:2019-08-20     浏览:15    下载:0     体积:104.44K    
  溶酶体绿色荧光探针 LysoGreen
 
  Catnumber:KFS130
 
  Storeat-20℃for6months,避光
 
  ForResearchUseonly
 
  一、产品描述
 
  溶酶体绿色荧光探针LysoGreen探针是荧光素pH指示探针,可以用来区分酸性细胞器,使得动态研究活细胞内溶酶体生物合成和功能成为可能。LysoView染料是在酸性细胞器内富集,可导致其质子化。而质子化可以减少染料的侧链上弱碱,减少荧光淬灭,使得生产的荧光强度增加。因此,LysoGreen试剂表现出pH依赖性,在酸化条件下,荧光强度增加。
 
  这些探针可以单独或者组合使用,检测酸化的溶酶体和细胞内溶酶体的功能改变。例如,在某些肿瘤细胞的溶酶体具有较低的pH值,而有的肿瘤细胞则相反。此外,一些细胞的细胞器酸化缺陷表现为囊性纤维化和其他病症。LysoGreen探针在此类应用上非常广泛有意义。
 

特性

探针名称

Ex (nm)

Em (nm)

pKa

Lyso 

373

425

5.1

Lyso 绿

443

505

5.2

 

二、产品包装

 

组份

KFS130

储存条件

溶酶体绿色荧光探针 LysoGreen

1 mM in DMSO, 200μL

-20℃,避光

  
       三、操作说明
 
  细胞制备与染色
 
  取出之后,预热试剂至室温,再开盖,短暂离心小瓶,使得微量DMSO液体沉淀瓶底。
 
  染色探针的浓度选择取决于不同的实验类型。建议使用一些初始条件进行指导摸索。
 
  1.1 用培养基或者其他缓冲液稀释1mM的探针原液,建议使用浓度至少1μM,但为了减少可能的过量,染料浓度应尽可能保证低。注意:有实验表明如细胞在染色后用无染料的培养基孵育,会看到荧光信号减弱以及细胞出泡现象。
 
  1.2 对于贴壁细胞,盖玻片爬片至合适的会合度时,添加37度预热的探针染液,选择合适细胞生长的条件,进行30分钟~2小时的孵育。再用新鲜培养基替换染色液。再选择合适滤光片的荧光显微镜观察细胞,如果细胞没有呈现染色,建议增加标记物的浓度或者增加孵育的时间。
 
  1.3 对于悬浮细胞,离心细胞,吸出上清,轻轻用37度预热的含探针的染色液重悬细胞,选择合适细胞生长的条件,进行30分钟~2小时的孵育。再以新鲜培养基离心重悬细胞。再选择合适滤光片的荧光显微镜观察细胞,如果细胞没有呈现染色,建议增加标记物的浓度或者增加孵育的时间。
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日期: 2019-08-20
标签: 荧光 产品
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