在此介绍免疫亲和层析净化高效液相色谱法测定谷物中玉米赤霉烯酮的含量(依据GB/T5009.209-2008)。

1.原理

试样中的玉米赤霉烯酮用乙腈-水提取后，提取液经免疫亲和柱净化、浓缩后，用配有荧光检测器的液相色谱仪进行测定，外标法定量。按下式计算：

式中X——试样中玉米赤霉烯酮的含量，ug/kg

A——样液中玉米赤霉烯酮的峰面积

A₀——空白样液中玉米赤霉烯酮的峰面积

p——标准工作溶液中玉米赤霉烯酮的浓度，ug/mL

V——样液最终定容体积，mL

m——最终样液所代表的试样量，g

As——标准工作溶液中玉米赤霉烯酮的峰面积

2.液相色谱条件

色谱柱：C₁₈柱，150mm×4.6mm(内径)，粒度4um，或相当者；流动相：乙腈-水-甲醇(46+46+8)；流速：1.0mL/min；检测波长：激发波长274nm，发射波长440mm；进样量：100uL；柱温：室温。

在上述色谱条件下，玉米赤霉烯酮的保留时间为3.4min。玉米赤霉烯酮标准溶液色谱图见图6-9。

3.要点提示

本法适用于谷物(玉米、小麦等)中玉米赤霉烯酮的测定。方法检出限为5ug/kg。

图6-9 玉米赤霉烯酬标准品的液相色谱图

文章来源：《食品理化检测技术》