液相色谱仪的日常操作条件：温度：10-40℃；相对湿度<80％；是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备，使用后液相色谱仪检测器的保养对液相色谱仪的使用寿命影响至关重要。

　　1、氘灯外罩污染：不要用手直接接触氘灯外罩，手上含有的油脂类物质会阻碍氘灯的光源的发射光，导致读数偏低。一旦不小心用手直接接触到了氘灯，在氘灯安装之前可用异丙醇对氘灯做清洁工作。

　　在使用高效液相的过程中，管路的堵塞是常发生的故障之一。下文为您介绍液相色谱管路堵塞的原因与解决方法。

　　液相色谱管路阻塞的原因：

　　1、没有很好过滤流动相；

　　2、样品中有微粒；

　　3、泵或进样器垫圈产生碎片；

　　4、预柱、护柱和分析柱中漏出填料；

　　在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC 也已成为不可或缺的。流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。下面分析一下，高效液相色谱脱气的必要性，并总结归纳了脱气常用的方法。

　　一、脱气的必要性

　　高效液相色谱法按分离机制的不同分为液固吸附色谱法、液液分配色谱法（正相与反相）、离子交换色谱法、离子对色谱法及分子排阻色谱法。

　　1、液固色谱法

　　对液相色谱系统的故障作逻辑推理是快速纠正毛病的关键。某些一目了然的故障，如接头漏液紧紧螺丝就可以。有些故障一时难以捉摸，如峰拖尾的问题一时找不到原因。遵循有规则的模式解决问题十分重要，而不是胡乱地逐一检查每个部件。

　　1、粗看一遍。

　　实验室制备液相色谱仪分类方法 实验室制备液相色谱仪分类方法有多种。

　　1、按进样自动性可分：

　　实验室制备自动进样液相色谱仪和实验室制备手动进样液相色谱仪。

　　2、按固定相和活动相的极性大小可分：

　　实验室制备正相液相色谱仪和实验室制备反相液相色谱仪。

　　高效液相色谱仪高压输液系统由贮液器、高压输液泵、过滤器、脱气装置和梯度洗脱装置等组成。

　　一、贮液器：

　　贮液器用来提供足够数量的符合要求的流动相，以完成分析工作。所有溶剂在放入贮液罐前必须经过0.45um滤膜过滤，除去溶剂中的机械杂质，以防输液管道和进样阀产生阻塞现象。

　　1、液相色谱仪整机保养

　　（1）短期停机

　　在完成一天工作以后，都要停机等第二天再继续工作，则可按以下步骤停机。

　　A）关闭二次仪表（记录仪、积分仪或色谱工作站）。

　　B）关闭检测器电源（同时切断柱箱温度检测器的电源）。

　　C）停止恒流泵工作，然后切断其电源。

　　1、液相色谱仪的日常操作条件：温度：10-40℃；相对湿度<80％；是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。

　　2、泵的保养：

　　（1）使用流动相尽量要清洁；

　　（2）进液处的沙芯过滤头要经常清洗；

　　（3）流动相交换时要防止结晶；

　　（4）避免泵内堵塞或有气泡;

　　高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（输送压力可达4、9~107Pa）；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

　　特点

　　一、开机

　　1)打开计算机，登陆windows操作系统。

　　2)打开主机各模块电源（从上至下），待各模块完成自检后，再双击桌面“仪器1联机”图标,进入化学工作站，从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面。

　　3)把各流动相放入溶剂瓶中。

　　制备液相色谱中，有三个可以观察到的状态：柱压、检测器基线、谱图。通过观察和记录这三个状态可以监测仪器是否正常。若某个状态出现异常，故障排查和解决方案如下。

　　1、柱压波动

　　1）吸液管路进气泡

　　①溶剂不足，吸滤头吸入空气，添加溶剂并排气泡。

　　高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。与经典的液相色谱相比，具有高效液相所用的固定相粒度小（5um-10um）、传质快、柱效高的优势。近年来，在保健食品功效成分、营养强化剂、维生素类、蛋白质的分离测定等应用广泛。世界上约有80％的有机化合物可以用HPLC来分析测定。

　　色谱柱是运用于色谱仪系统中起着分离作用的仪器，是色谱仪分析系统的核心部件，色谱柱柱效的高低影响着检测速率的快慢以及检测结果的准确性。因此，为了提高色谱柱的柱效，保证液相色谱仪分析检测的灵敏性，了解液相色谱柱的选购技巧尤为重要。

　　①溶剂中的不溶物

　　②样品中的不溶物

　　液相色谱仪结构复杂，且不同型号的色谱仪，出故障时产生的现象有可能不同，以下几项液相色谱仪常见故障排除方法仅供参考：

　　1、检测器开机时屏幕显示不正常，出现缺字、坐标图形异样、光标无法移动等象

　　原因：工作电源不正常或仪器附件有强干扰源存在；

　　1、液相色谱柱的结构：

　　a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。

　　液相色谱仪基线不稳原因有哪些?

　　1、流动相中可能有溶解气体。 用超声脱气15～30分钟或用大气脱气。

　　2、系统中可能有漏液处。检查病确定漏液的位置并排除。

　　3、泵的密封可能损坏，使泵压不稳。更换泵的密封。

　　高效液相色谱仪色谱柱性能的评价包括评价内容和评价方法等方面。

　　一、评价内容：

　　1、分离效能。

　　2、对指定溶质的选择性。

　　3、在不同PH值介质中的稳定性。

　　4、不同批次但同型号填料间性能的重现性。

　　5、适宜的操作压力等。

　　高效液相色谱仪是实验中常见的仪器之一，色谱柱的灵敏度是确保实验准确性的重要原因，那么当色谱柱的灵敏度不够时，我们该如何去解决呢？应该从以下几个方面去分析：

　　1、样品量不足：解决办法为增加样品量

　　2、样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子

　　与比重计相关仪器液相色谱仪是由检测器、输液泵、进样器、柱温箱、混合器、色谱柱等部分组成。判断液相色谱仪的指标有噪音，漂移，小检测浓度，定性定量重复性等。

　　1、一般定性
　　用已知物和直接对照法定性，这是一种相对可靠的方法，主要可以分为以下四种：
　　1）保留时间和保留体积
　　2）相对保留值
　　3）已知物增加峰高法
　　4）双柱货双体系
　　实验表明，各类同系物在两根不同柱上的Vg值有如下关系：

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