KFS144 细胞骨架蓝色荧光探针说明书

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       KFS144 细胞骨架蓝色荧光探针说明书

       Cat numberKFS144
       Store at -20℃ for 6 months,避光
       For Research Use o
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一、产品描述

 

本染料是 F-肌动蛋白的高亲和力探针,由蘑菇毒素制成,与蓝色荧光染料偶联。 以纳米摩尔浓度使用时,鬼笔毒素是方便的探针,可用于对甲醛固定和打孔的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的 F-肌动蛋白进行标记、鉴别和定量。

Ex/Em:350nm/450nm,比抗体染色更优越。适合于固定和通透的样本。

荧光标记的鬼笔环肽与肌动蛋白对于不同的物种,包括植物和动物具有几乎相同的高结合属性。鬼笔环肽结合具有高选择性,而 F-肌动蛋白红色荧光。呈现出很少的非特异性染色。本产品可以用于荧光显微镜、微孔板、比色皿。

二、产品包装

 

 

组份

KFS144

储存条件

细胞骨架蓝色荧光探针

200U/mL200μL

-20℃,避光

 


  三、操作说明

  染色操作

  本实验操作不特定针对某一特别的实验体系,但是具有很大的普遍适用性。以下操作以贴壁细胞爬片为例。注:针对贴壁细胞或96微孔板样本,每个样建议100μL染色工作液体积,本试剂盒约可操作80tests。

  甲醛固定细胞

  1.1 以预温的PBS,pH7.4,洗涤细胞两次。

  1.2 3.7%甲醛固定细胞,室温10分钟。注意:甲醇可能导致肌动蛋白扭曲变形,因此避免选用任何含有甲醇类的固定剂。

  1.3 PBS洗涤两遍。

  1.4 丙酮-20度洗涤盖玻片或者含0.1%TritonX-100的PBS洗涤3~5分钟。

  1.5 PBS洗涤两遍。

  1.6 5μL甲醇原储液加入200μL的PBS中预染色每张盖玻片,加入1%BSA到染色液中,以减少非特异性背景。同样,在染色之前,也可以选择用1%BSA的PBS预孵育固定的细胞。

  1.7 选择合适的染色液体积,建议100μL,室温浸泡盖玻片20分钟,可以加上封盖,防止水分蒸发。

  1.8 PBS洗涤两遍。

  1.9 长期保存,细胞应在空气中晾干,加盖在一个封固封片剂。避光2-6℃,以这种方式制备的试样保持至少6个月的肌动蛋白染色。

  同时进行固定、促渗和罗丹明鬼笔环肽染色

  罗丹明鬼笔环肽在4%的多聚甲醛固定缓冲液中稳定时间较短,需要快速的固定、透化和标记。

  2.1 制备1mL含有50~100μg/mL的1-十六酰-sn-丙三醇-磷酸胆碱和3.7%的甲醛溶液,然后添加5~10units的染料。

  2.2 染色液没过细胞,4度孵育20分钟。

  2.3 缓冲液快速洗涤三次。

  2.4 封片观察。
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日期: 2019-08-20
标签: 荧光 产品 蛋白 蘑菇 毒素
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